Temas Subtemas
CLASES TEÓRICAS
Introducción á PCR convencional e á PCR cuantitativa (qPCR).
Consideracións básicas. Aplicacións xerais. Instrumentación e métodos de detección.
Preparación de mostras e transcripción reversa (RT-PCR). Deseño de cebadores e sondas. Desenvolvemento do experimento. Optimización de parámetros. Recomendacións. Análise das Curvas de Fusión.
Cuantificación e normalización. Limitacións e futuras aplicacións da qPCR.
Fontes de información: soporte informático e bibliográfico útil para o desenvolvemento desta técnica.
CLASES PRÁCTICAS
Extracción de ARN a partir de células, sangue e tecido en parafina.
Diseño de cebadores e sondas para PCR a tempo real empregando aplicacións bioinformáticas.
Cuantificación de ácidos nucleicos por espectrofotometría. Medida da calidade do ARN obtido mediante a relación A260/A280.
Preparación e desenvolvemento dunha PCR en tempo real. Cuantificación absoluta e relativa. Interpretación dos resultados.