Guía DocenteCurso
Facultade de Ciencias da Saúde
  Inicio | galego | castellano | english | A A A |  
Mestrado Universitario en Asistencia e Investigación Sanitaria (plan 2012)
 Asignaturas
  Técnicas de Manipulación e Análise de Ácidos Nucleicos
   Contidos
Temas Subtemas
Tema 1. Os ácidos nucleicos. 1.1. Estrutura dos ácidos nucleicos.
1.2. Función dos ácidos nucleicos.
1.3. Illamento dos ácidos nucleicos.
1.4. Cuantificación dos ácidos nucleicos.
Tema 2. A Reacción en Cadea da Polimerasa (PCR). 2.1. Variantes do método da PCR.
2.2 PCR cuantitativa ou en tempo real (qPCR): cuantificación absoluta e relativa.
2.3. Aplicacións da PCR na investigación
médica.
Tema 3. A variabilidade xenética. 3.1. Técnicas de análise da variabilidade xenética: PCR e secuenciación do ADN.
3.2. Variabilidade xenética do ADN mitocondrial.
Tema 4. Ferramentas bioinformáticas para o análise de
secuencias de ácidos nucleicos. 		4.1. Para o análise de secuencias codificantes e non codificantes.
4.2. Para a búsqueda de polimorfismos e variabilidade en estudos poblacionais.
4.3. Para o análise de secuencias repetitivas e a súa implicación en diversas patoloxías.
Tema 5. Técnicas de inmunoprecipitación da cromatina
(ChIP). 		5.1. Para a detección de proteínas unidas
a secuencias de ADN (ADN-ChIP)
5.2. Para a detección de proteínas unidas
a secuencias de ARN (ARN-ChIP).
Tema 6. Introducción á citoxenética molecular. 6.1. Hibridación in-situ fluorescente
(FISH). 6.2. Aplicacións da citoxenética na
investigación: DNA Breakage Detection-
FISH (DBD-FISH) e COFISH.
Tema 7. Metodoloxía da mutaxénese aleatoria e dirixida
do ADN. 		7.1. Aplicacións prácticas da mutaxénese
aleatoria no laboratorio de investigación.
Tema 8. Enxeñería xenética. 8.1. A tecnoloxía do ADN recombinante.
8.2. Métodos de entrega de ADN:
transfección e transducción.
8.3. Investigación en animais
transxénicos. 8.4. Xeración de animais
“knockout”.
PRÁCTICAS.
1.- Illamento do ARN a partir dun cultivo celular.
2.- Desenrrolo dunha RT-PCR
3.- Desenrrolo dunha PCR en tempo real. 4.- Secuenciación de ADN. 5.- Software de análise.
6.- Co-immunoprecipitacion.
7.- Estudo citoxenético.
8.- Mutaxénese.
9.- Transfección.
10.- Observación de resultados.

 PRÁCTICAS (desenvolvemento):
1.- Illamento do ARN a partir dun cultivo celular. Cuantificación e análise do ARN illado mediante bioanalizador.
2.- Desenrrolo dunha RT-PCR: preparación das reaccións e programación do termociclador. Análise do ADNc obtido trala RT-PCR.
3.- Desenrrolo dunha PCR en tempo real: preparación das reacción e programación do termociclador. Interpretación dos resultados obtidos.
4.- Secuenciación de ADN. Visualización e funcionamento dun secuenciador automático de ADN.
5.- Software de análise. Emprego de diferentes softwares para a análise de secuencias de ácidos nucleicos.
6.- Co-immunoprecipitacion e identificación dos complexos proteicos que interaccionan cunha determinada proteína.
7.- Estudo citoxenético. Preparación de mostras para estudo citoxenético (cariotipo e FISH). Clasificación de cromosomas no cariotipo e identificación de anomalías cromosómicas mediante
FISH.
8.- Mutaxénes. Mutaxénese dirixida de dominios ou residuos aminoacídicos en xenes de interese clínico. Estudos fenotípicos da selección de mutantes.
9.- Transfección de plásmidos en células eucariotas ou procariotas e estudo das células transfectadas.
10.- Observación de resultados. Observación ó microscopio de liñas de empaquetamento.
Universidade da Coruña - Rúa Maestranza 9, 15001 A Coruña - Tel. +34 981 16 70 00  Soporte Guías Docentes