Guia docenteCurso
Facultad de Ciencias de la Salud
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Mestrado Universitario en Asistencia e Investigación Sanitaria (plan 2012)
 Asignaturas
  Técnicas de Manipulación y Análisis de Ácidos Nucleicos
   Contenidos
Tema Subtema
Tema 1. Los ácidos nucleicos. 1.1. Estructura de los ácidos nucleicos.
1.2. Función de los ácidos nucleicos.
1.3. Aislamiento de los ácidos nucleicos.
1.4. Cuantificación de los ácidos nucleicos.
Tema 2. La Reacción en Cadea de la Polimerasa (PCR). 2.1. Variantes del método de la PCR.
2.2 PCR cuantitativa o en tiempo real (qPCR): cuantificación absoluta y relativa.
2.3. Aplicaciones de la PCR en la investigación médica.
Tema 3. La variabilidad genética. 3.1. Técnicas del análisis de la variabilidad genética: PCR y secuenciación del ADN.
3.2. Variabilidad genética del ADN mitocondrial.
Tema 4. Herramientas bioinformáticas para el análisis de
secuencias de ácidos nucleicos. 		4.1. Para el análisis de secuencias codificantes y no codificantes.
4.2. Para la búsqueda de polimorfismos y variabilidad en estudios poblacionales.
4.3. Para el análisis de secuencias repetitivas y su implicación en diversas patologías.
Tema 5. Técnicas de inmunoprecipitación de la cromatina
(ChIP). 		5.1. Para la detección de proteínas unidas a secuencias de ADN (ADN-ChIP)
5.2. Para la detección de proteínas unidas a secuencias de ARN (ARN-ChIP)
Tema 6. Introducción a la citogenética molecular. 6.1. Hibridación in-situ fluorescente (FISH).
6.2. Aplicaciones de la citogenética en la investigación: DNA Breakage Detection- FISH (DBD-FISH) y COFISH.
Tema 7. Metodología de la mutagénesis aleatoria y dirigida
del ADN. 		7.1. Aplicaciones prácticas de la mutagénesis aleatoria en el laboratorio de investigación.
Tema 8. Ingeniería genética. 8.1. La tecnología del ADN recombinante.
8.2. Métodos de entrega de ADN: transfección y transducción.
8.3. Investigación en animales transgénicos.
8.4. Geración de animales “knockout”.
PRÁCTICAS.
1.- Aislamiento del ARN a partir de un cultivo celular.
2.- Desarrollo de una RT-PCR
3.- Desarrollo de una PCR a tiempo real.
4.- Secuenciación de ADN.
5.- Software de análisis.
6.- Co-immunoprecipitacion.
7.- Estudio citogenético.
8.- Mutaxénese.
9.- Transfección.
10.- Observación de resultados.

 PRÁCTICAS (DESARROLLO):
1.- Aislamiento del ARN a partir de un cultivo celular. Cuantificación y análisis del ARN aislado mediante bioanalizador.
2.- Desarrollo de una RT-PCR: preparación de las reacciones y programación del termociclador. Análisis del ADNc obtenido tras la RT-PCR.
3.- Desarrollo de una PCR en tiempo real: preparación de las reacciones y programación del termociclador. Interpretación de los
resultados obtenidos.
4.- Secuenciación de ADN. Visualización y funcionamiento de un secuenciador automático de ADN.
5.- Software de análisis. Empleo de diferentes softwares para el análisis de secuencias de ácidos nucleicos.
6.- Co-immunoprecipitacion e identificación de los complejos proteicos que interaccionan con una determinada proteína.
7.- Estudio citogenético. Preparación de
muestras para estudio citogenético (cariotipo y FISH). Clasificación de
cromosomas en el cariotipo e identificación de anomalías cromosómicas mediante FISH.
8.- Mutagénes. Mutagénese dirigida de dominios o residuos aminoacídicos en genes de interés clínico. Estudios fenotípicos de la selección de mutantes.
9.- Transfección de plásmidos en células eucariotas o procariotas y estudio de las células transfectadas.
10.- Observación de resultados. Observación al microscopio de líneas de empaquetamiento.
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